ساخت ناقل بیانی حاوی ژن vp۱ ویروس تب برفکی سویه fmdv type o/irn/۱/۲۰۰۷) o) تأیید پروتئین تولید شده در سلولهای کلیه بچه هامستر (bhkt۷) و ارزیابی پاسخ ایمنی در مدل موشی
نویسندگان
چکیده
هدف: هدف ساخت ناقل بیانی حاوی ژن vp1 ویروس تب برفکی سویه o جداسازی شده در ایران، بیان پروتئین و ارزیابی پاسخهای ایمنی در موش است. مواد و روشها: سویه ویروس تب برفکی o از گوسالهای در شهر ری در سال 1386 جداسازی، سروتایپ و ژن vp1 این ویروس در ناقل ptz57r/t و ناقل بیانی pcdna3.1+ الحاق شد. برای بررسی بیان پروتئین، ژن vp1 بدون کدون خاتمه در ناقل pegfp-n1 بالادست ژن gfp کلون شد. ناقلهای pegfp-n1-vp1 و pcdna3.1+-vp1 در رده سلولی کلیه بچه هامستر ترانسفکت و بیان پروتئین الحاقی gfp-vp1 با میکروسکوپ معکوس فلوئورسنت و بیان پروتئینvp1 به روش الکتروفورز عمودی پروتئینها و لکهگذاری وسترن تأیید شد. ناقل بیانی pcdna3.1+-vp1 بهعنوان dna واکسن به موشها تلقیح و پاسخ آنتیسرم خنثی کننده (snt) و قدرت تکثیر لنفوسیتهای(t (si در این حیوانات اندازهگیری شد. نتایج: هضم آنزیمی ناقلهای کلون شده با ژن vp1، ورود این ژن در سه ناقل را تأیید و بیان پروتئین vp1 در ناقل بیانی pcdna3.1+ به روش لکهگذاری وسترن با مشاهده باند اختصاصی پروتئین هدف کاملاً تأیید شد. وجود لکههای سبز نیز بیان پروتئین الحاقی vp1-gfp را تأیید نمود. مقادیر snt و si در گروه موشهای تلقیح شده با dna واکسن نسبت به گروههای کنترل دارای افزایش معنیداری بود. نتیجهگیری: این ژن با موفقیت تکثیر، کلون و بیان شد. با توجه به تأیید بیان پروتئین vp1 و افزایش معنیدار snt و si از ناقل pcdna3.1+-vp1 بهعنوان dna واکسن استفاده شد و پاسخهای ایمنی در مدل موشی ارزیابی شد.
منابع مشابه
ساخت dna واکسن fmdv-type o-vp1 gene ، رادیوواکسن ویروس تب برفکی و ارزیابی پاسخ ایمنی در موشهای balb/c با استراتژی پرایم بوست
هدف اصلی واکسنهای دامی بهبود و کنترل محصولات دامی و کاهش مصرف دارو و هورمون ها می باشد. ویروس بیماری تب برفکی باعث زیان های اقتصادی زیادی در دام ها می شود. مطالعات ایمونولوژیکی در ویروس تب برفکی نشان داده است که اپی توپ غالب مسئول القائ پاسخ آنتی بادی خنثی کننده، باقیمانده های آمینو اسیدی موجود در لوپ g-h هستند که لوپ سطحی پروتئین ساختمانی vp1 می باشد. واکسن رایج این بیماری به دلایلی چون نیمه ...
15 صفحه اولساخت ناقل بیانی pGCGi حاوی ژن GUS اینترون‌دار و تأیید آن با روش‌های ریزپرتابی و تزریق اگروباکتریوم
بیان موقت یک روش سریع و آسان در آنالیز بیان پروموتر است. این روش تحت تأثیر موقعیت ورود تراژن در ژنوم واقع نمی‌شود، زیرا این نکته می‌تواند بیان تراژن را در روش انتقال دایمی تحت تأثیر قرار دهد. بیان موقت از راه‌های مختلف نظیر: اگرواینفیلتراسیون، ریزپرتابی و وکتورهای ویروسی قابل انجام است. بیان موقت مبتنی بر اگروباکتریوم کارآیی بالا و قابل قبول در آنالیز بیان تراژن، خاموشی ژن، برهمکنش پاتوژن-میزبا...
متن کاملاثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین
Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...
متن کاملاثر بربرین در تنظیم آستروسیتهای Gfap+ ناحیه هیپوکمپ موشهای صحرایی دیابتی شده با استرپتوزوتوسین
Background: Diabetes mellitus increases the risk of central nervous system (CNS) disorders such as stroke, seizures, dementia, and cognitive impairment. Berberine, a natural isoquinolne alkaloid, is reported to exhibit beneficial effect in various neurodegenerative and neuropsychiatric disorders. Moreover astrocytes are proving critical for normal CNS function, and alterations in their activity...
متن کاملطراحی، ساخت و بیان اپی‌توپ‌های پروتئین VP1 ویروس تب برفکی سروتیپO ایران
Foot-and-mouth disease (FMD) is an extremely infectious and occasionally fatal viral disease with a rapid onset and a short course that affects cloven-hoofed animals and results in considerable financial losses. For this reason, availability of more reliable and efficient vaccines against Foot-and-mouth disease virus (FMDV) is felt as a necessity. The purpose of this study is to develop a ...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۴، شماره ۳، صفحات ۶۹-۷۹
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023